XXXIII Congreso Nacional de la Sociedad Española de Trombosis y Hemostasia

XXXIII Congreso Nacional de la Sociedad Española de Trombosis y Hemostasia 158 CO-175  Una nueva estrategia fibrinolítica en un modelo experimental de ictus isquémico asociado a diabetes Navarro-Oviedo M. 1 , Roncal C. 1 , Zandio B. 2 , Rodríguez J. A. 3 , Páramo J. A. 1 , Muñoz R. 2 , Orbe J. 2 1 Laboratorio de Aterotrombosis. Centro de Investigación Médica Aplicada (CIMA). Pamplona. 2 CIBER Cardiovascular (CIBERCV). Instituto de Salud Carlos III. España. 3 Servicio de Neurología. Complejo Hospitalario de Navarra. Pamplona Introducción: La reperfusión temprana del tejido isquémico con activador tisular del plasminógeno (tPA) es el único tratamien- to aprobado en pacientes con ictus isquémico agudo. La diabetes es un factor de riesgo que aumenta 2-3 veces la incidencia del ictus isquémico. La eficiencia de recanalización del tPA en estos pacientes se ha asociado con una menor eficacia y con un aumento del riesgo de hemorragia cerebral. Basándonos en datos previos de nuestro grupo que demuestran un efecto fibrinolítico y neuropro- tector de la metaloproteinasa-10 (MMP10) en un modelo murino de ictus isquémico (Orbe et al. , Cardiovasc Res 2017), hemos analizado si el uso de la MMP10 reduce el daño cerebral en el ictus isquémico asociado a diabetes. Material y métodos: Se indujo diabetes tipo I a ratones C57BL/6 con una dosis de estreptozotocina (180 mg/kg) y dos semanas más tarde se llevó a cabo el modelo de ictus isquémico por inyección de trombina en la arteria cerebral media. Evaluamos el efecto del tratamiento con MMP10 recombinante (6,5 µg/kg), tPA (10 mg/Kg) o tPA/MMP10 midiendo el daño cerebral y dis- tintos parámetros hemostáticos [complejos trombina/antitrombina (TAT), inhibidor de la fibrinólisis activado por trombina (TAFI) e inhibidor del activador de plasminógeno-1 (PAI-1)] a las 24 h y 3 días tras la isquemia. Resultados: El tratamiento con MMP10 solo o en combi- nación con tPA redujo el volumen de lesión 24 h después de la isquemia (p < 0,05), mientras que el tPA no lo modificó. A día 3, todos los tratamientos mostraron una reducción en el volumen del infarto comparados con el salino (p < 0,05), aunque la reduc- ción fue máxima en aquellos que recibieron la combinación tPA/ MMP10 (p < 0,05). Además, tras la terapia combinada, se observó un descenso en la degeneración neuronal tanto a las 24 h como a los 3 días tras la isquemia (p < 0,05). El estudio de los parámetros de coagulación y fibrinólisis mostró un descenso significativo en los niveles plasmáticos de TAT en los ratones tratados con MMP10 o tPA/MMP10 24 h tras la inducción de la isquemia (p < 0,05). Sin embargo, no se encontraron diferencias en la actividad de TAFI y PAI-1 tras los diferentes tratamientos. Conclusiones: Nuestros datos sugieren que los tratamientos con MMP10 o tPA/MMP10 son más eficaces que el tPA reduciendo el tamaño del infarto y la degeneración neuronal tras un ictus isquémico asociado a diabetes.Además, estos tratamientos disminuyen la genera- ción de trombina lo que sugiere que laMMP10 podría tener un efecto fibrinolítico y antitrombótico en el tratamiento del ictus isquémico. Fuentes de financiación: Ministerio de Economía y Compe- titividad PI15/01807, Programa de la Unión Europea FEDER [CIBERCV (CB16/11/00371)]; Sociedad Española de Trombosis y Hemostasia (SETH); Gobierno de Navarra (02/2015) y Funda- ción Patrimonio Praga. CO-176  CM-352: un nuevo agente antifibrinolítico inhibidor de metaloproteinasas en la hemorragia intracraneal Navarro-Oviedo M. 1 , Wu N. 1 , Asurmendi B. 1 , Belzunce M. 1 , Irisarri A. 2 , Rabal O. 3 , Zandio B. 2 , Páramo J. A. 4 , Muñoz R. 5 , Orbe J. 2 1 Laboratorio de Aterotrombosis. Centro de Investigación Médica Aplicada (CIMA). Pamplona. 2 Servicio de Neurología. Complejo Hospitalario de Navarra. Pamplona. 3 Plataforma de Desarrollo de Moléculas Pequeñas, CIMA. Pamplona. 4 CIBER Cardiovascular (CIBERCV). Instituto de Salud Carlos III. Madrid. 5 Servicio de Hematología. Clínica Universidad de Navarra. Pamplona Introducción: La hemorragia intracraneal (HIC) supone el 10-15% de todos los ictus y conlleva una gran morbimortalidad. Se han implicado diversos componentes del sistema hemostático, la inflamación y las metaloproteasas (MMPs). El CM-352 es un nuevo agente antifibrinolítico inhibidor de MMPs que reduce el crecimiento del hematoma y la lesión cerebral en modelos experi- mentales de HIC. El objetivo de este trabajo es determinar el efecto del CM-352 sobre la dinámica de formación y composición del coágulo de pacientes con HIC. Métodos: Se recogieron muestras de sangre de 18 pacientes con HIC (11 de etiología hipertensiva y 7 de angiopatía amiloide) a su ingreso en la Unidad de Ictus y a las 24 h. Mediante trom- boelastometría (ROTEM ® ) en presencia y ausencia de CM-352 (1,5 µM), se analizó la influencia del inhibidor en la cinética de formación del coágulo, que se recuperó e incluyó en parafina para estudios immunohistoquímicos. Se determinó el contenido de leucocitos, plaquetas, fibrinógeno y marcadores de activación neutrofílica (histona H3 citrunilada, NETs) y se analizó su aso- ciación con los parámetros clínicos, bioquímicos y de imagen de los pacientes. Resultados: En los pacientes con HIC de etiología hiperten- siva el crecimiento del hematoma y el estado inflamatorio fue mayor que en la amiloidea. Los pacientes de etiología amiloidea presentaron una mayor incidencia de hemorragia subaracnoidea (p < 0,05). No observamos diferencias en los parámetros de ciné- tica de formación del coágulo entre las distintas etiologías, ni por acción del CM-352. Sin embargo, la histología del trombo mostró un descenso significativo en la densidad de fibrinógeno en los pacientes con etiología amiloide en comparación con la hiper- tensiva (p < 0,05) así como un descenso en la densidad de NETs en los obtenidos a las 24 h tratados con CM-352 en pacientes con HIC hipertensiva . La densidad de NETs y de leucocitos se asociaron de forma positiva con los niveles de glucosa (r = 0,585, y r = 0,518 respectivamente, p < 0,01) y la densidad de NETs fue mayor en los pacientes dislipémicos (p = 0,01). Conclusiones : Nuestros datos sugieren que el CM-352 no modifica ex vivo los parámetros hemostáticos en pacientes con HIC, pero su administración tras 24 h podría tener efectos antiin- flamatorios mediados por la reducción de NETs. Fuentes de financiación: Ministerio de Economía y Compe- titividad PI15/01807, Programa de la Unión Europea FEDER; Sociedad Española de Trombosis y Hemostasia (SETH); Gobierno de Navarra (02/2015) y Fundación Patrimonio Praga.