XXXIII Congreso Nacional de la Sociedad Española de Trombosis y Hemostasia

Comunicaciones Orales 125 Figura. 1. La variante de AT forma complejos de alto peso molecular por puentes disulfuro, posee afinidad por heparina y actividad anticoagulante. Los sobrenadantes de las células HEK293-EBNA transfectadas transitoriamente con AT MUT y AT WT fueron purificados mediante cromatografía de afinidad por heparina. La movilidad elecroforética de la AT MUT es similar a la AT WT en condiciones reductoras (A), pero en condiciones no reductoras la AT MUT forma complejos de alto peso molecular por puentes disulfuto (B). Sorprendentemente, la AT MUT posee actividad anti-FIIA (C) (AT: antitrombina; AT WT : AT silvestre; AT MUT : AT mutada; FIIa: trombina; HNF: heparina no fraccionada; T-AT: complejos trombina-antitrombina; SDS: dodecilsulfato sódico. CR: condiciones no reductoras. Figura 2. Expresión y secreción de la AT mutada en modelo recombinante: efecto dominante negativo. Las células HEK293-EBNA fueron transfectadas transitoriamente con AT MUT , AT WT y TFPI. También se realizaron experimentos de cotransfección de AT MUT con ATWT (AT MUT /AT WT ) y con TFPI, que permi- tieron evidenciar un efecto dominante negativo potente y específico para la AT (AT: antitrombina; AT WT : AT silvestre; AT MUT : AT mutada; TFPI: inhibidor de la vía del factor tisular; SDS: dodecilsulfato sódico; CR: condiciones reductoras; n: número de western blot).