XXXIII Congreso Nacional de la Sociedad Española de Trombosis y Hemostasia

XXXIII Congreso Nacional de la Sociedad Española de Trombosis y Hemostasia 12 El PCI tiene un amplio espectro de acción, inhibiendo también a los activadores del plasminógeno tipo uroquinasa y tisular, a la trombina, al factor Xa, a la kallikrein y al factor XIa (9). Además, participa en la reproducción humana pudiendo inhibir la unión del espermatozoide al oocito y su penetración (12). En 1996, describimos un ensayo para la medida de los niveles circulantes de APC (13) y demostramos que una reducción de sus niveles es un riesgo independiente de tromboembolismo venoso (TEV) y arterial (14,15). Además, estos bajos niveles de APC tienen un fuerte componente hereditario (16), por lo que inves- tigamos posibles mutaciones en los componentes de la vía de la PC. Para ello, seleccionamos pacientes y controles con bajos y altos niveles de APC y genotipamos los genes de la PC, del EPCR y de la TM. En el gen del EPCR ( PROCR ) identificamos 2 polimorfismos en el exón 4, uno localizado en la región codi- ficante (4600ª > G, Ser219 > Gly) y otro en la 3’-UTR (4678G > C). El alelo 4678C estaba asociado con mayores niveles de APC y menor riesgo de TEV (17). Estos 2 polimorfismos son representativos de 2 de los 4 haplotipos (H) del PROCR (Alelo 4678C, H1; alelo 4600G, H3). Debido a la relativamente alta prevalencia de estos 2 haplotipos, y a que la etiología del TEV es multifactorial, nosotros analizamos su asociación con el ries- go de TEV, especialmente en pacientes portadores de factor V Leiden o protrombina 20210A. Los portadores de FV Leiden con el genotipo 4678CC (H1H1) del PROCR tienen un menor riesgo de TEV, probablemente debido a que tienen mayores niveles de APC circulante (18) (Tabla II) mientras que los portadores de protrombina 20210A con el alelo 4600G (H3) del PROCR tienen un riesgo aumentado (19), posiblemente debido a la asociación de este alelo con niveles de EPCR solubles aumentados en el plasma (Tabla III) . Estos polimorfismos también modifican el riesgo de infarto de miocardio (20). Para comprobar si estos polimorfismos se asocian realmente con cambios en la expresión a nivel de célula endotelial, los geno- tipamos en células endoteliales humanas en cultivo procedentes de 111 cordones umbilicales y analizamos la distribución celular del EPCR y de la TM. En cultivos de estas células, el alelo 4678C (H1) del PROCR se asocia con niveles aumentados de EPCR unido a la membrana (con capacidad de activación de la PC), con mayor activación de PC por trombina sobre la superficie de la membrana y con menores niveles de EPCR soluble (sin capacidad de acti- var a la PC) en el medio de cultivo (Figura 2) . Por el contrario, las células con el alelo 4600A (H3) tienen reducido EPCR uni- do a la membrana, aumentados niveles de EPCR soluble en el medio de cultivo y una menor capacidad de activar a la PC (21) (Figura 3) . Estos resultados concuerdan con los obtenidos en los estudios plasmáticos en los que se observa que el alelo 4678C del PROCR protege del TEV y el infarto de miocardio y se asocia con Tabla II. Influencia de los polimorfismos 4600A/G y 4678G/C del PROCR sobre el riesgo de trombosis en 276 portadores de FV Leiden de 81 familias estudiadas (incluyendo a los propósitos) Polimorfismo Portadores sintomáticos Portadores asintomáticos OR (95% CI) (n = 95) n Frecuencia (n = 181) n Frecuencia 4600A/G Alelo A 171 0,900 325 0,898 1 § Alelo G 19 0,100 37 0,102 1,0 (0,5-1,7)* 0,8 (0,4-1,6)† genotipo AA 77 0,811 145 0,801 1 § genotipo AG & 18 0,189 36 0,199 0,9 (0,5-1,8)* 0,8 (0,5-1,5)† 4678G/C alelo G 115 0,605 267 0,461 1 § alelo C 75 0,395 195 0,539 0,7 (0,4-0,8)* 0,5 (0,3-0,8)† genotipo GG 33 0,347 39 0,215 1 § genotipo GC 49 0,516 89 0,492 0,6 (0,4-1,2)* genotipo CC 13 0,137 53 0,293 0,3 (0,1-0,6)* 0,3 (0,2-0,8)† §Grupo de referencia; *Análisis univariante; † Análisis multivariante para edad, sexo, protrombina 20210G/A y polimorfismo 4600A/G o 4678G/C; &Incluye 1 propósito y 1 portador asintomático con el genotipo GG. Tabla I. Niveles de complejos de proteína C activada con α 1 -antitripsina (APC: α 1 AT) y de trombina-antitrombina (TAT) en controles y en diversas situaciones clínicas con hipercoagulabilidad APC: α 1AT TAT Grupo n ng/mL ng/mL Control 40 7 ± 2 2 ± 1 Embarazo normal (3 er trimestre) 30 16 ± 3*** 3 ± 1* Preeclampsia 18 27 ± 10*** 7 ± 5** Hemodiálisis 8 Antes 15 ± 6** 4 ± 2** 2 h después del inicio 25 ± 11*** 9 ± 6** Tumor ginecológico 16 20 ± 9*** 7 ± 6** Diabetes 21 13 ± 5** 2 ± 1 Contraceptivos orales 15 12 ± 5** 6 ± 8* Los valores se expresan como media ± DS. Los valores de los grupos clínicos son comparados con los del grupo control. *p < 0,01; **p < 0,001; ***p < 0,0001.