XXXIII Congreso Nacional de la Sociedad Española de Trombosis y Hemostasia

Comunicaciones Orales 151 uno de los 5 casos con deleción del gen abarcaba los exones 2-5, por tanto con sitio de ruptura en el intrón 5. Conclusiones: Nuestro estudio revela que la duplicación del exón 6 es una nueva alteración relativamente frecuente en pacientes con deficiencia de antitrombina (1%) y representa casi la mitad de los casos con grandes defectos moleculares en SERPINC1 . Es difícilmente detectable con los métodos disponibles, por lo que desarrollamos un método simple y específico para la detección de duplicaciones en tándem del exón 6. La presencia de 6 secuencias Alu flanqueando al exón 6 hacen que esta región sea un punto caliente para recombinaciones que provoquen deleciones, dupli- caciones en tándem y potencialmente transposiciones, las cuales pueden producir deficiencia de antitrombina (tanto severa como moderada) a través de un procesamiento aberrante de intrones y exones. CO-166  Identificación y caracterización funcional de una familia con un FXII de mayor tamaño López-Gálvez R. 1 , de la Morena-Barrio M.E. 1 , Revilla N. 1 , Amigo M. L. 1 , Miñano A. 1 , Padilla J. 1 , Salloum-Asfar S. 1 , Toderici M. 1 , López-Lera A. 2 , Vidal F. 3 , Vicente V. 1 , Corral J. 1 1 Servicio de Hematología y Oncología Médica. Hospital General Universitario Morales Meseguer. Centro Regional de Hemodonación. Universidad de Murcia. IMIB-Arrixaca, CIBERER. Murcia. 2 Servicio de Inmunología. Hospital Universitario La Paz, CIBERER. Madrid. 3 Coagulopaties Congènites. Banc de Sang i Teixits. Barcelona. Introducción: El factor XII (FXII) es el primer elemento de la ruta de contacto, aunque su función hemostática en condicio- nes fisiológicas es cuestionada. Sin embargo, el FXII es relevante en la activación patológica de la coagulación y desempeña pape- les importantes en la fibrinólisis, la formación de bradiquinina y el sistema del complemento. Alteraciones moleculares en F12 pueden causar deficiencia de FXII aunque solo las que afectan a Thr309 tienen consecuencias patológicas incrementando el riesgo de angiodema-III. Objetivo: Caracterizar genética, funcional y clínicamente una familia con un FXII aberrante. Material y métodos: El gen F12 se estudió mediante secuen- ciación (Sanger y NGS: Myseq, Illumina) y MLPA (para estu- diar grandes alteraciones). El FXII, FXI, AT, fibrinógeno, TFPI y α 1-antitripsina plasmáticos se analizaron por Western blot . La activación de FXII y FXI se evaluó mediante Western blot y méto- dos funcionales tras incubar el plasma con silica micronizada o dextrán sulfato. El plasma se trató con neuraminidasa y N-glicosi- dasa-F para análisis glicómico. La inactivación por C1-inhibidor se determinó mediante ELISA. Se analizó la formación y degradación del coágulo activando con factor tisular (FT) y cloruro cálcico, con/sin activador tisular del plasminógeno recombinante (rTP-A). Resultados: Realizando el estudio de la fase de contacto en pacientes sometidos a quimioterapia identificamos un paciente con un FXII de mayor tamaño (5KDa) (Figura 1) . Varón magrebí de 23 años diagnosticado de leucemia mieloblástica aguda, y sometido a trasplante autólogo de progenitores hematopoyéticos de sangre periférica. Nueve años más tarde tiene una recaída y recibe un trasplante haploidéntico de su hermano. Durante su evolución no ha presentado complicaciones infecciosas relevantes, trombosis, hemorragias o enfermedad injerto contra receptor. Presentó nueva recaída a los 16 meses post-trasplante, sin respuesta a infusión de dosis escalonadas de linfocitos de su donante, por lo que está actualmente recibiendo quimioterapia de rescate. El FXII aberrante se mantuvo invariable en el tiempo y era idéntico en su hermano. La búsqueda de la anomalía molecular fue infructuosa tras anali- zar profundamente el gen F12 . La hiperglicosilación se descartó mediante estudios glicómicos y por ser un defecto específico de FXII. El FXII aberrante se activaba más lentamente, generando dos formas de FXIIa, una compatible con los 5KDa adicionales obser- vados en la molécula completa, y otra de igual tamaño que el control (Figura 2) . Los niveles coagulantes de FXII y el TTPa fue- ron normales. No observamos diferencias de inhibición del FXII aberrante por C1-inhibidor. La formación del coágulo de fibrina fue normal. Sin embargo, los dos portadores del FXII aberrante presentaron una menor fibrinólisis inducida por rTP-A. Conclusiones: Identificamos el primer FXII aberrante con tamaño notablemente mayor que el silvestre cuya base molecular no se localiza en el gen codificante ni se explica por una modifi- cación post-traduccional general. Sin embargo, su activación no está afectada y no tiene consecuencias en la hemostasia salvo una Figura 1. Identificación de un FXII aberrante en el paciente y su hermano. La flecha continua muestra la migración electroforética del FXII normal, mientras que la discontinua muestra la del FXII variante. Figura 2. Análisis de la activación de FXII plasmático del paciente y un control con diferentes concentraciones de dextran sulfato (DXS) mediante Western blot.