XXXIII Congreso Nacional de la Sociedad Española de Trombosis y Hemostasia

XXXIII Congreso Nacional de la Sociedad Española de Trombosis y Hemostasia 154 CO-170  El diagnóstico de EVW, PTT, SHUa y trastornos plaquetarios - ventajas de next generation sequencing (NGS) Fidalgo T. 1 , Martinho P. 1 , Pinto S. C. 1 , Oliveira A. 1 , Borras N. 2 , Coucelo M. 1 , Maia T. 1 , Manco L. 3 , Calado J. 4 , Catarino C. 5 , Rodrigues M. F. 5 , Carvalho M. 6 , Lopes M. 6 , Caetano G. 7 , Corrales I. 8 , Vidal F. 8 , Ribeiro M. L. 1 1 Departamento de Hematología Clínica. Centro Hospitalar e Universitário de Coimbra. Coimbra, Portugal. 2 Coagulopatías Congénitas. Banco de Sangre y Tejidos de Barcelona. Barcelona, España. 3 Departamento de Ciencias Sociales. Research Centre for Anthropology and Health (CIAS), University of Coimbra. Coimbra, Portugal. 4 Serviço de Nefrologia. Hospital de Curry Cabral. Lisboa, Portugal. 5 Serviço de Imunohemoterapia. Hospital Santa Maria. Lisboa, Portugal. 6 Serviço de Imunohemoterapia. Hospital São João, Porto, Portugal. 7 Centro Hospitalar do Algarve. Faro, Portugal. 8 Coagulopatías Congénitas. Banco de Sangre y Tejidos de Barcelona. Barcelona, España Introducción: El desarrollo de las tecnologías de next-gene- ration sequencing (NGS) con paneles de genes dirigidos que se están introduciendo en la práctica clínica proporcionan beneficios sustanciales para el diagnóstico definitivo en las enfermedades hematológicas. Para comprender mejor a variabilidad clínica, que se encuentra incluso dentro de las familias, es necesario caracte- rizar el perfil mutacional. La NGS reveló un mayor rendimiento, economía y rapidez, y estas ventajas evidencian que es ideal para secuenciación cuando se espera una heterogeneidad genética. Objetivo: Mejorar la capacidad de diagnóstico desarrollamos un flujo de trabajo por NGS con paneles de genes para el diag- nóstico de enfermedad von Willebrand (EVW), microangiopatías trombóticas (MT) - púrpura trombocitopénica trombótica (PTT) y síndrome hemolítico urémico atípico (SHUa); y más recientemente un panel más alargado para coagulopatías hereditarias, trombosis y trastornos plaquetares (CHTP). Material y métodos: La metodología NGS, preparación de librarías y uso de los paneles de genes fue según el protocolo Ion Torrent™ PGM sequencing system (Thermo Fisher Scientific). El estudio utilizó 3 etapas de optimización: (a) gen VWF estudio de 92 pacientes con EVW pertenecientes a 60 familias aparentemente no relacionadas; (b) painel ADAMTS13 /genes complemento estudio de pacientes con MT aguda, 7 PTT hereditarias y 34 con presu- mible SHUa; (c) panel CHTP con 44 genes estudio reciente que solo realzamos 6 pacientes con patología hemorrágica y etiología desconocida. Resultados: En los pacientes con EVW identificaran-se 62 VWF mutaciones diferentes, 27 de los cuales no habían sido des- critas previamente. El NGS contribuye a una amplia visión de los alelos mutantes presentes en cada tipo EVW. Veintinueve pacientes (48,3%) tenían dos o más mutaciones; fueron detectadas muta- ciones con efectos pleiotrópicos, y el NGS permitió una clasifi- cación adecuada en 7 casos. Además, el diagnóstico diferencial entre EVW de tipo 2B y EVW tipo plaquetar (n = 1), síndrome de Bernard-Soulier y EVW 2B (n = 1), la hemofilia A ligera y EVW 2N (n = 2) fue posible. En los pacientes con MT, 37 varian- tes raras diferentes, 8 nuevas (en ADAMTS13 , CFH, y CD46 ), se identificaron en 7 genes. Los pacientes con PTT fueron homoci- gotos (n = 6), heterocigotos compuestos (n = 2) y heterocigotos (n = 5) para 11 variantes ADAMTS13 (6 mutaciones patogénicas). La mutación patogénica más común p.Cys754Arg se correlaciona con el mismo haplotipo ADAMTS13 y el grupo sanguíneo O 1 O 1 , lo que sugiere un origen común y con alta prevalencia en la población portuguesa. Entre los 34 pacientes SHUa, 17 fueron heterocigotos para 23 variantes en los diferentes genes del complemento con consecuencias distintas, que van desde mutaciones patogénicas individuales asociados con penetrancia completa a variantes benig- nas que causan SHUa solo cuando se combina con otras variantes y /o con el haplotipo de riesgo CFH , CD46 o la deleción CFHR1-3 . El estudio de los 6 pacientes de etiología desconocida reveló tras- tornos plaquetares con variantes raras patogénicas: heterocigotos (n = 2) NBEAL2 y ITGB3; dobles heterocigotos (n = 4) entre los genes NBEAL2; ITGA2B; ITGB3 y ANKRD26. Conclusión: Los resultados revelaron la NGS una herramienta valiosa en nuestra práctica clínica, complementando los estudios funcionales y proporcionando un diagnóstico más correcto, ayu- dando a determinar el tratamiento más eficaz en estas enfermeda- des complejas. Tratamientos antitrombóticos CO-171  ¿Puede la farmacogenética de los antagonistas de la vitamina K mejorar la predicción del riesgo de sangrado de la escala HAS-BLED? Serna Muñoz M. J. 1 , Rivera Caravaca J. M. 1 , González Conejero R. 2 , Esteve Pastor M. A. 2 , Valdés M. 3 , Vicente V. 3 , Lip Gregory Y.H. 4 , Marín F. 1 , Roldán V. 5 1 Departamento Hematología y Oncología Médica. Hospital General Universitario Morales Meseguer. Instituto Murciano de Investigación Biosanitaria (IMIB-Arrixaca). Murcia. 2 Centro Regional de Hemodonación. Universidad de Murcia, CIBERER. Instituto Murciano de Investigación Biosanitaria (IMIB-Arrixaca). Murcia. 3 Departamento de Cardiología. Hospital Clínico Universitario Virgen de la Arrixaca. Instituto Murciano de Investigación Biosanitaria (IMIB-Arrixaca), CIBER-CV. Murcia. 4 Departamento Hematología y Oncología Médica. Hospital General Universitario Morales Meseguer. Instituto Murciano de Investigación Biosanitaria (IMIB-Arrixaca). Murcia. Centro Regional de Hemodonación. Universidad de Murcia. CIBERER, Instituto Murciano de Investigación Biosanitaria (IMIB-Arrixaca). Murcia. 5 Institute of Cardiovascular Sciences. University of Birmingham. United Kingdom. Aalborg Thrombosis Research Unit. Department of Clinical Medicine. Aalborg University. Aalborg, Dinamarca Introducción: Ciertos polimorfismos genéticos comunes tienen una gran influencia en la respuesta inter-individual a los antagonistas de la vitamina K (AVK). Los principales efectores de la variabilidad de la dosis son los polimorfismos en los genes de la vitamina K epóxido reductasa complejo 1 (VKORC1) y el citocromo P450 2C9 (CYP2C9). A pesar de la relativa contribución de los genotipos VKORC1 y CYP2C9 a los resultados adversos cuando se inicianAVK, pocos estudios han investigado la relación entre estos polimorfismos y el sangrado mayor. En el presente