XXXIII Congreso Nacional de la Sociedad Española de Trombosis y Hemostasia

Ponencias 67 CS-003. Identificación de nuevos elementos implicados en la variabilidad interindividual de los niveles plasmáticos de FXI en sujetos con deficiencia congénita de FXI Salloum-Asfar S. 1 , Esteban J. 2 , De la Morena-Barrio M. E. 1 , Miñano A. 1 , Padilla J. 1 , Vicente V. 1 , Corral J. 1 1 Servicio de Hematología y Oncología Médica. Hospital General Universitario Morales Meseguer. Centro Regional de Hemodonación. Universidad de Murcia. IMIB-Arrixaca. Murcia. CIBERER. Murcia. 2 Servicio de Hematología. Hospital Virgen del Castillo. Yecla, Murcia FXI: C% aPTTr A P1 P4 P5 P3 P1 P2 C FXI (80 kDa) B Figura 1. Deficiencia de FXI identificada en una familia con heterocigo- sis para la mutación p.Cys398Tyr. A. Árbol genealógico. La presencia de deficiencia en heterocigosis de FXI se muestra con símbolos semirrellenos (la mutación p.Cys398Tyr en color azul y p.Glu226Arg en rojo). Los niveles de FXI:C (expresado en %) y TTPa (expresado como ratio) de cada familiar se indican. B. FXI plasmático control (C) y los miembros de la familia. FXI se identificó tras separación electroforética en geles de poliacrilamida en condiciones desnaturalizantes (SDS-PAGE) y posterior identificación mediante Western blot empleando el anticuerpo anti-FXI humano. Introducción El FXI es un elemento hemostático emergente tanto en hemo- rragia (relacionada con su deficiencia), como en trombosis (relacio- nada tanto con el riesgo, que determina los niveles elevados de FXI, como con la protección antitrombótica que produce la reducción de sus niveles. Por ello, la identificación de elementos implicados en el control de los niveles de FXI es un reto relevante. Los escasos estudios realizados en este sentido se han centrado en el análisis del gen codificante ( F11 ) en sujetos sanos de la población general o en estudios caso/control de patología trombótica, identificando pocas alteraciones genéticas con escaso y cuestionado efecto fun- cional, debido al menos en parte, al amplio rango de niveles de FXI en estos grupos. Las alteraciones moleculares funcionales en F11 podrían tener mayor peso en sujetos con deficiencia de FXI. Objetivo Identificar nuevos elementos funcionales en F11 analizando este gen en una cohorte de sujetos con deficiencia de FXI. Además, la variación de niveles de FXI en sujetos con deficiencia podría ser relevante tanto en la protección antitrombótica como en el riesgo hemorrágico. Métodos El estudio se realizó en 183 sujetos con deficiencia de FXI por- tadores de 4 mutaciones recurrentes (p.Cys38Arg, pCys398Tyr, pGlu547Lys y pPro520Leu). El FXI plasmático se evaluó mediante 4 ensayos de coagulación y Western blot . El análisis genético incluyó la secuenciación completa (24.048 pb) del gen F11 (PGM, Ion Torrent). Resultados Observamos una amplia variabilidad en los niveles de FXI en sujetos con deficiencia, independientemente de la mutación causativa (Tabla I) . El estudio molecular además de las mutaciones causantes de la deficiencia identificó 114 variantes, 22 no descritas (todas intrónicas y en su mayoría restringidas a casos aislados). El polimorfismo p.Glu226Arg (MAF: 0,002) se identificó en una familia portadora de la mutación p.Cys398Tyr en heterocigosis. Curiosamente, la presencia asilada del polimorfismo p.Glu226Arg no causa deficiencia, pero en heterocigosis compuesta exacerba el efecto deletéreo de la mutación p.Cys398Tyr (Figura 1) . Los polimorfismos rs2289252 y rs2036914, asociados previamente con niveles altos de FXI en sujetos no deficientes, también aumentan los niveles de FXI (5%) en sujetos deficientes. Además, nuestro estudio muestra que los polimorfismos rs925451 y rs4253399 (en desequilibrio de ligamiento, D = 0,8), se asocian significativa- mente con mayores niveles de FXI (43% vs. 50%; p = 0,02). Este efecto fue particularmente relevante en portadores de la mutación p.Cys38Arg, con fenotipo CRM‑ tipo 3 y por tanto con niveles de FXI más bajos. Conclusiones La disección molecular del gen del F11 en sujetos con defi- ciencia congénita de FXI es un modelo sensible para identificar nuevos elementos implicados en la modulación de los niveles FXI: C% aPTTr P1 117% 1.13 P2 70% 1.01 P3 37% 1.24 P4 34% 1.33 P5 140% 1.14