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Pósteres
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PC-461
Recuento absoluto de las poblaciones de
células en el líquido cefalorraquídeo de
pacientes con leucemia linfoblástica aguda B
De Sousa M. E., Palmeira C., Godinho I., Pires A. M., Azevedo C.,
Martins G.
Instituto Português de Oncologia Francisco Gentil. Porto, Portugal
Introducción:
La afectación del sistema nervioso central
(SNC) por las células patológicas es una evaluación obligada en
los pacientes pediátricos. Por las normas internacionales, se lleva
a cabo el recuento de células en cámara de Neubauer y la caracte-
rización morfológica mediante microscopía. Junto a la evaluación
citológica, la inmunofenotipaje, por citometría de flujo (CF) es
utilizada para caracterizar las poblaciones celulares. Puesto que la
CF es un método más sensible y específico, tratamos de analizar un
protocolo de recuento absoluto por CF comparándolo con el méto-
do de referencia, con el propósito de implementarlo en la rutina.
Métodos:
Se evaluaron 23 muestras de LCR de pacientes pediá-
tricos con leucemia linfoblástica aguda B (LLA-B). Las muestras se
procesaron para la caracterización inmunofenotípica de las poblacio-
nes presentes y detección de células neoplásicas.Antes de la adquisi-
ción se añadió un volumen de esferas (Perfect Count CYTOGNOS)
a cada tubo. La adquisición de las muestras se hizo en el citómetro
de flujo FACSCanto II (BD) y los archivos obtenidos se analizaron
con el software Infinicyt (Cytognos). Los resultados obtenidos por
CF se compararon con la evaluación citológica.
Resultados:
La comparación del recuento de células absolu-
to por los dos métodos demostró una correlación de 0,999. Las
23muestras analizadas por CF presentan células, aunque en la
cámara 4 son negativas (en estos cuatro casos, el número de célu-
las/µl por CF varió entre 0,07 y 1,13). Ningún caso de menos de 5
células/µl por microscopía, mostró más de 5 células/µL por CF. Por
otro lado, las 6 muestras que en cámara han revelado un valor igual
o superior a 5 células/µL (5-317 células) mostraron una variación
de 4,6 a 453 células/µL, por CF.
Conclusiones:
Los recuentos absolutos de las poblaciones
de células por CF presentes en el LCR de pacientes pediátricos
con LLA-B, mostraron una alta correlación con los resultados del
método convencional (en la cámara de recuento Neubauer). La
CF permitió, no solo hacer el recuento absoluto de las células,
sino también caracterizar las diferentes poblaciones presentes en el
LCR, la diferenciación de células anormales respecto a las células
normales y se reveló un método útil para implementar en la rutina.
PC-462 ¿Es suficiente un único test para
diagnosticar el anticoagulante lúpico?
Martínez-Robles V., Ballina B., Machado González M. Á.,
González Laguna S., García Furones J., Pérez Gutiérrez B.,
Rodríguez García J. A.
Complejo Asistencial Universitario de León. León
Introducción:
Se denomina anticoagulante lúpico (AL) a un
grupo heterogéneo de inmunoglobulinas dirigidas contra fosfolí-
pidos (FL) de carga negativa. Debido a su heterogeneidad, aunque
in vitro pueden prolongar los tiempos de coagulación dependientes
de FL, no hay ningún test que pueda identificarlo en su totalidad,
constituyendo un reto diagnóstico. El comité de estandarización de
la ISTH recomienda: a) realizar dos ensayos diferentes dependien-
tes de FL considerando el de veneno de víbora de Russel diluido
(dRVVT) como test principal; b) evidenciar que la prolongación
no se corrige en prueba de mezclas 1:1 con plasma normal; y c)
confirmación mediante los mismos tests de escrutinio usando altas
concentraciones de FL.
Objetivo:
Evaluar si con un único test, junto con el apoyo del
estudio basal de coagulación (EBC), pudiera ser suficiente para el
diagnóstico de AL.
Método:
Se analizaron 273 estudios considerados positivos de
entre los realizados en nuestro laboratorio. Todas las muestras se
procesaron en un analizador ACL TOP 700 tras una doble centri-
fugación para garantizar la ausencia de contaminación plaquetar
como fuente de FL. Se realizó estudio de
screening
y confirmación
de Sílica Clotting Time (SCT) y de dRVVT (HemosIL, IL). Se
interpretó como AL positivo cuando la ratio normalizada fuese
= 1,20 en cualquiera de los dos ensayos, considerándose débil
(ratio: 1,21-1,49), moderado (1,50-1,99) e intenso por encima de
ese valor.
Resultados:
En 79 casos (28,9%) la única prueba alterada fue
el SCT y en 99 (36,3%) lo fue el dRVVT, observándose alteración
de ambas en el resto. En el 26,4% de casos la existencia de un AL
positivo no tuvo ninguna repercusión en el EBC (ratios =1,30);
mientras que en el 59% originó un alargamiento exclusivamen-
te del TTPA, en el 2,6% solo del TP y en el restante 12,1% de
ambas vías de la coagulación. La probabilidad de que siendo una
de las determinaciones intensamente positiva (ratio = 2) la otra sea
normal fue baja, aumentando esta de forma importante ante una
positividad débil
(Tabla I)
. El EBC fue completamente normal en
el 25,3% (20/79) de los pacientes que únicamente presentaban
dRVVT alterado y en el 39,4% (39/99) de los que solo la presen-
taban en SCT, siendo esto más frecuente cuando la positividad de
los test era débil
(Tabla II)
.
Conclusiones:
1. En un 65,2% de los casos fue positivo un único ensayo
dependiente de FL, fundamentalmente cuando la positi-
vidad es débil.
2. Aunque el TTPA fue el test de rutina más sensible, no hubo
ninguna alteración del EBC hasta en un 26,4% de los casos.
3. Aun considerando las potenciales alteraciones del EBC, si
únicamente se hubiese determinado el dRVVT, un 7,3%
de los casos hubiesen quedado sin diagnosticar. Por tanto,
consideramos que la recomendación de la ISTH de realizar
un doble ensayo está plenamente justificada.
Tabla I
Ratio SCT % dRVVT normal
Ratio dRVVT % SCT normal
1,20-1,49
60/84 (71,4%)
1,20-1,49
81/130 (62,3%)
1,50-1,99
18/56 (32,1%)
1,50-1,99
16/53 (30,2%)
≥ 2
1/33 (3%)
≥ 2
2/10 (20%)