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XXXII Congreso Nacional de la Sociedad Española de Trombosis y Hemostasia
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mediante PCR en tiempo real con el Light Cycler 480 (Roche)
con sondas fluorescentes específicas de alelo. La secuenciación
directa se realizó con el equipo ABI3500 (Applied Biosystem)
por el método de Sanger.
Resultados:
En el análisis por PCR en tiempo real LC480 con
sondas específicas de alelo del polimorfismo
C677T
del paciente en
estudio se observó un patrón atípico en las curvas de hibridación y
alteración de las temperaturas de hibridación. La secuenciación di-
recta reveló la presencia, en heterocigosis, de una variante cercana,
rs200100285 A/G que genera un cambio de aminoácido Val225Ile.
Esta variante está descrita en las bases de datos genéticas de acceso
público por el Proyecto 1000 Genomas, y es poco frecuente en nues-
tro medio (< 0,01%). En nuestro centro se han procesado 500 análi-
sis del polimorfismo C677T con el equipo LightCycler en 10 años.
En ningún caso se ha detectado la presencia del rs200100285 por
lo que esta variante es rara en nuestro medio.
Conclusiones:
La determinación mediante PCR en tiempo real
con sondas fluorescentes específicas de alelo con el sistema Light
Cycler resulta una técnica robusta para el estudio de polimorfismos
y mutaciones puntuales en diagnóstico clínico. La presencia de
alguna variante cercana a la estudiada altera el patrón de curvas
de hibridación y hacen posible su detección.
Red Investigación Cardiovascular RD12/0042/0032.
Plaquetas/biología
vascular
PB-151
Ausencia de actividad ADAMTS-13 en
paciente tras tratamiento con clopidogrel
Pino Ferre M., Palomo Udaeta M., Escolar Albadalejo G., Pereira
A., Díaz Ricart M.
Servicio de Hemoterapia-Hemostasia. Centre de Diagnòstic Biomèdic (CDB).
Hospital Clínic. IDIBAPS. Barcelona
Introducción:
La púrpura trombocitopénica trombótica (PTT)
es un síndrome hematológico con una elevada mortalidad asociada,
caracterizado por trombocitopenia, anemia hemolítica microan-
giopática, y alteraciones neurológicas con frecuencia. La mayoría
de los casos de PTT son debidos a un déficit grave de la metalo-
proteasa del factor de von Willebrand (vWF), ADAMTS-13, por
desarrollo de anticuerpos inhibitorios (PTT adquirida). Existen
casos de PTT adquirida asociados al tratamiento con antiagregan-
tes plaquetarios dirigidos a inhibir el receptor para el ADP, como
la ticlopidina y el clopidogrel.
Material y métodos:
Una mujer (32 años) fue atendida en nues-
tro hospital a causa de la aparición repentina de ictericia, petequias,
disartria y hemiparesia tras 7 días de tratamiento con clopido-
grel. La paciente estaba alerta, sensible y orientada mentalmente.
Ocho años antes, la paciente presentó una hemorragia subarac-
noidea debido a la ruptura de un aneurisma, y se le practicó una
embolización intravascular. Una semana antes del nuevo ingreso,
la angiografía 3D de control mostró signos de revascularización
del aneurisma, por lo que se practicó nueva embolización y colo-
cación de stent. La paciente inició tratamiento con aspirina (100
mg/día) y clopidogrel (300 mg, seguido de 75 mg/día). Tras el in-
greso y para confirmar diagnóstico diferencial de PTT, realizamos
hemograma, medida de parámetros bioquímicos, LDH en suero,
frotis de sangre, niveles del complemento y determinación de los
parámetros relacionados con ADAMTS-13 (actividad, mediante
FRETS, antígeno y presencia de IgG anti-ADAMTS-13).
Resultados y conclusión:
Los resultados de laboratorio fueron
los siguientes: Hb de 79 g/l, recuento plaquetario de 11x109/l,
reticulocitos de 80 x 109/l, bilirrubina de 3,1 mg/dl, creatinina de
0.8 mg/dl, y LDH de 2.250 U/l (normal < 450 U/l), presencia de
numerosos esquistocitos, tiempos de protrombina y tromboplastina
normales, serología para VHB, VHC y VIH negativa, complemen-
to normal y ausencia de anticuerpos antinucleares. La actividad
ADAMTS-13 fue < 5%, con presencia de IgG (52,7 U/ml), antes
del recambio plasmático, y se recuperó durante y después del tra-
tamiento, tras disminuir el título de IgG (9,9 U/ml y 5,25 U/ml,
respectivamente). Los niveles de ADAMTS-13 antigénico fueron
inicialmente de 103,4 ng/ml y aumentaron hasta 573.65 ng/ml
después de la finalización del tratamiento, aunque se mantuvo por
debajo del rango normal reportado (700-1.400 ng/ml). La suspen-
sión del tratamiento y el recambio plasmático llevó a la remisión
completa y sostenida de la paciente. Este caso supone una nueva
evidencia sobre la asociación entre el tratamiento con clopidogrel
y la aparición de PTT. La PTT apareció en un plazo de una semana
después de iniciar el tratamiento.
PB-152
Evaluación de los estudios por sospecha de
trombopenia por heparina en un hospital
de tercer nivel
Villalba Montaner M., Salvador Rupérez E., Lacalle Aicua L.,
Espinosa Lara N., Segura Díaz A., Fernández Mosteirín N., Calvo
Villas J. M., Delgado Beltrán P.
Hospital Universitario Miguel Servet. Zaragoza
Introducción:
La trombocitopenia por anticuerpos contra el
complejo factor plaquetario 4 (FP4)-heparina (TH) es una com-
plicación clínica grave que debe sospecharse en pacientes en tra-
tamiento con heparina que desarrollan trombopenia y/o trombosis
durante su administración.
Objetivo:
Revisar las solicitudes de los estudios de laboratorio
por sospecha de TH en nuestro laboratorio en el último año.
Pacientes y métodos:
Se analizaron las variables demográficas,
características clínicas y datos de laboratorio de los pacientes con
sospecha clínica y/o analítica de TH a los que se solicitó deter-
minación de anticuerpos antiFP4-heparina. Para su detección se
empleó un inmunoensayo turbidimétrico de partículas de látex
en muestras de plasma citratado con el reactivo HemosIL HIT-
Ab
(PF4-H)
TM
.
Resultados:
Se revisaron las solicitudes de 17 pacientes con
una mediana de edad de 71,5 años (rango, 54-91). La mediana
del recuento plaquetar al ingreso fue 159.000/mm
3
(rango, 6.000-