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Comunicaciones orales
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dent, cambios estadísticamente significativos en el nivel de
AD
(media pre-tratamiento 67, post-tratamiento 81,07 p = 0,006),
GI
(13,93
vs
. 23,29,
p = 0,000),
EE: A
(14,21
vs.
7,43, p = 0,001),
D
(10,57
vs.
4,93, p = 0,006),
SE
(16,57
vs.
23,71, p = 0,000),
IE
(3,29
vs.
2,14, p = 0,003),
AS
(62,50
vs.
72,14, p = 0,005),
LCI
(14,21
vs.
26,86, p = 0,000 ),
AE
(60,57
vs.
98,64, p = 0,001) y
CV
(49,64
vs.
67,50, p = 0,007).
Conclusiones:
La adherencia a la profilaxis reduce sangrados
y está asociada a CV, resultando de crítica importancia desarrollar
programas para promocionarla. La TCC ha provocado cambios
en variables clínicas relevantes:
adherencia, conocimiento sobre
la enfermedad, estado emocional, interferencia en la vida diaria,
apoyo social, creencias promotoras del autocuidado y CV,
resul-
tados preliminares que alientan a su uso en PcHG.
Financiación: Novo Nordisk HERO Research Grant 2014.
CO-150
Diagnóstico preciso de hemofilia A y
enfermedad de Von Willebrand mediante
secuenciación masiva de los genes
F8
y
VWF,
relevancia de las variantes intrónicas
Bastida J. M. (1), González-Porras J. R. (2), Jiménez C. (2), Benito
R. (2), Ordóñez G. R. (3), Álvarez-Román M. T. (4), Janusz K. (2),
Fontecha M. E. (5), Castillo D. (3), Fisac R. (6), García-Frade L.
J. (5), Aguilar C. (7), Martínez-Badás M. P. (8), Bermejo N. (9),
Herrero S. (10), Balanzategui A. (1), Martín-Antorán J. M. (11),
Cebeiro M. J. (12), Aguilera C. (13), Prieto M. (14), Jiménez-Yuste
V. (4), Hernández-Rivas J. M. (4), García-Sanz R. (4), González-
Díaz M. (4), Sarasquete M. E. (4)
(1) Hospital Universitario de Salamanca, IBSAL. Salamanca. (2) Instituto de
Investigación Biomédica de Salamanca-IBSAL. Centro de Investigación Cáncer-
CIC. Hospital Universitario de Salamanca. Salamanca. (3) DREAMgenics S. L.
Oviedo, Asturias. (4) Unidad de Hemofilia. IDI-PAZ. Hospital Universitario La Paz.
Madrid. (5) Hospital Universitario Río Hortega. Valladolid. (6) Hospital General.
Segovia. (7) Complejo Asistencial de Soria. Soria. (8) Complejo Asistencial
de Ávila. Ávila. (9) Hospital San Pedro de Alcántara. Cáceres. (10) Hospital
General. Guadalajara. (11) Hospital Río Carrión. Palencia. (12) Hospital Clínico
Universitario de Valladolid. Valladolid. (13) Hospital de El Bierzo. Ponferrada,
León. (14) Complejo Asistencial de Burgos. Burgos
Introducción:
La caracterización molecular de la hemofi-
lia A (HA) es necesaria para confirmar su diagnóstico, establecer
el estado de portadora, diferenciarla de la enfermedad de Von Wi-
lledrand (EVW) y detectar el riesgo para desarrollar inhibidores.
En los casos de HA moderada y leve se lleva a cabo mediante la
secuenciación (Sanger) directa de los exones. Este método, caro
y laborioso, falla hasta en el 10% de los casos. Las variantes ge-
néticas causantes de la HA se distribuyen de forma heterogénea
por todo el gen, siendo más del 70%
missense/nonsense
e
InDels
.
Solo el 3% afecta a las regiones del
splicing
. Por otra parte, se
ha descrito, recientemente, la presencia de variantes genéticas en
regiones profundas intrónicas potencialmente involucradas en la
etiopatogenia de la HA. Además, pacientes con niveles descen-
didos de FVIII sin mutaciones en el gen
F8
, pueden presentar
variantes genéticas patogénicas en el gen
VWF
.
Material y métodos:
Un total de 60 casos (58 varones y
2 portadoras sintomáticas o con niveles descendidos de FVIII y de
las que desconocíamos la variante patogénica) fueron analizados
mediante la tecnología de Next-generation sequencing (NGS). Se
secuenciaron todas las regiones codificantes, intrónicas, promo-
toras y reguladoras de los genes
F8
y
VWF
mediante captura de
secuencia en una plataforma de MiSeq
®
(Illumina). Las variantes
genéticas identificadas se analizaron utilizando el software
Va-
riantStudio
(v2.2) e
Integrative Genomics Viewer.
Se utilizaron
programas bioinformáticos para predecir la patogenicidad de las
regiones intrónicas/splicing (DREAMgenics) y se recalificaron
según las últimas guías publicadas.
Resultados:
El 90,5% de las regiones se capturaron con una
profundidad de lectura de 641x y una cobertura media de al me-
nos 50x. Se identificaron 500 variantes/muestra, de media. En el
98% (59/60) de las muestras se detectó la variante genética cau-
sante de la deficiencia de FVIII: en 47 muestras afectó a la región
codificante de
F8
, en 8 a los exones de
VWF
y en 4 a las regiones
intrónicas en
F8
(Tabla 1)
. En relación con las variantes intró-
nicas, en tres pacientes no relacionados detectamos la variante
c.1010-842G > A en el intrón 7 y en el cuarto caso en el intrón
18 (c.5999-740T > C). El análisis de cosegregación de dichas va-
riantes fue concordante con la herencia de la HA. En 8 casos se
identificó una variante patogénica en
VWF
, recodificando el diag-
nóstico final
(Tabla 2)
. La variante c.2561G > A en el exón 20 del
gen
VWF
fue la más recurrente (4/8 50%). Solo en una caso se
identificó una variante probablemente benigna (c.2365ª > G) que
no permitió establecer un diagnóstico definitivo.
Conclusión:
El análisis simultáneo y completo de los genes
VWF
y
F8
permite la correcta caracterización molecular y diag-
nóstica de los pacientes con deficiencia de FVIII de una forma
rápida y costo-efectiva. Estudios funcionales y/o celulares son
necesarios para confirmar la patogenicidad de las variantes in-
trónicas.
Financiación: Este trabajo ha sido promovido por el IBSAL
e INNOCAMPUS y está financiado con una beca independiente
de Pfizer.