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Pósteres
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Trombosis
PC-414
Impacto del estudio molecular de los genes
PROC, PROS1 y SERPINC1 en pacientes con
trombosis venosa
Oliveira A. C., Martinho P., Fidalgo T., Pinto C., Gonçalves E.,
Marques D., Sevivas T., Salvado R., Ribeiro M. L.
Serviço de Hematologia Clínica. Centro Hospitalar Universitário de Coimbra.
Coimbra, Portugal
Introducción:
La trombosis venosa es una enfermedad multi-
génica y multifactorial siendo las deficiencias de proteína C(DPC),
S(DPS) y antitrombina(DAT), importantes factores de riesgo. La
prevalencia de estos déficits es baja (3-5%-DPC, 1,5%- DPS y
1-3%-DAT), siendo probablemente subdiagnosticados. Las pruebas
funcionales disponibles son poco sensibles a déficits ligeros o a cier-
tas mutaciones asociadas a niveles plasmáticos normales. El estudio
molecular de los genes PROC, PROS1 y
SERPINC1
aumenta la
capacidad diagnóstica de estas deficiencias, permite una correlación
genotipo/fenotipo y la identificación de portadores en riesgo.
Objetivo:
Estudiar los genes PROC, PROS1 y
SERPINC1
en
individuos con: a) déficits o niveles plasmáticos en el límite infe-
rior de la normalidad de PC y/o PS y/oAT; y b) niveles plasmáticos
normales, con historia de trombosis venosa significativa.
Material y métodos:
Fueron estudiados 172 individuos (128
mujeres), con TEP (8,1%), TV (33,7%), TA (7%) y complica-
ciones obstétricas (18,6%); 32,6% tenían una historia familiar
de trombosis. Estudios funcionales: PSL, PCact y ATact -niveles
comparados con valores de referencia ajustados a la edad, confir-
mados en 2 muestras diferentes. Estudios moleculares: ASPCR,
secuenciación directa Sanger y MLPA.
Resultados:
De los 172 pacientes estudiados, 130 tenían uno
de los déficits (34,3% DPC, 38,3% DPS y 3,5% DAT); 1 défi-
cit de PC y PS; 34 niveles normales de PC, PS y AT; 7 estaban
anticoagulados. La capacidad de detección de mutaciones fue de
97% DPC, 31,8% DPS y 33,3% en DAT. En 102 individuos se
encontraron 26 mutaciones diferentes (12 PROC, 10 PROS1 y 6
SERPINC1
). La mayoría de las mutaciones eran
missense
(SER-
PINC1: 75%; PROC: 75%; PROS1: 70%) siendo la p.Ser501Pro
(PS Herleen) encontrada en 46% individuos DPS. La mutación
PROC p.Arg199* se identificó en 18 pacientes con DPC tipo I
y asociada con un fenotipo grave. Las mutaciones PROS1 p.Val-
1191Cysfs*6, p.Ala307Cysfs*22 y p.R451* fueron encontradas
en DPS severas. En 2 individuos con DPS se detectó una hetero-
cigotia compuesta (PROS1 p.Pro76Leu y p.Ala307Cysfs*22); en
el individuo con déficit conjunto de PC y PS fue confirmada la
heterocigotia compuesta/doble (PROC-13A>G; PROS1 p.N166H
y p.A307Cfs*22). Fueron encontradas 2 mutaciones no descritas:
p.Cys105Arg PROC y
SERPINC1
p.YTyr95Serfs*18. El 60% de
los individuos con mutaciones en
SERPINC1
y 18,9% en PROS1,
tenían niveles normales de AT y PS. El tipo de mutación y su
localización en cada gen se correlacionaron, en déficits, con la
gravedad fenotípica. Las mutaciones encontradas, asociados con
niveles plasmáticos normales, son mutaciones
missense
con efecto
fenotípico más ligero.
Conclusiones
: El estudio del gen PROC, PROS1 y SERPINC1
ha permitido identificar mutaciones en casi todos DPC; en los DPS
y DAT el éxito es menor, sobre todo en los déficits ligeros. El estu-
dio de varios genes mediante secuenciación masiva (NGS) incluirá
otros genes candidatos y aumentará la capacidad de diagnóstico
de estos déficits. Por otro lado, se detectaron mutaciones en los
pacientes con niveles plasmáticos normales, lo que confirma el
fallo en la detección de cambios cualitativos por los ensayos fun-
cionales disponibles. Dado su valor añadido, la prueba molecular
debe ser considerada para identificar pacientes con antecedentes
personales/familiares significativos de trombosis, con niveles “nor-
males/
borderline
” de estas proteínas. La integración de los datos
clínicos juega un papel crucial en la correlación genotipo/fenotipo
para evaluar la necesidad de profilaxis primaria o secundaria y
medidas profilácticas en situación de riesgo.
PC-415
Caracterización molecular amplia de
una familia con trobofilia: implicación de
múltiples alteraciones genéticas de perfil
de bajo riesgo trombótico
Carrasco Expósito M., Tirado García I., Romero Román l., Vilalta
Setó n., Mateo Arranz J., Millón Caño J. A., Fontcuberta Boj J.
Unidad de Hemostasia. Hospital de Sant Pau. Barcelona
Introducción y objetivos:
La trombofilia es un enfermedad
compleja donde múltiples factores genéticos interaccionan entre
ellos y con el ambiente para generar un gradiente de susceptibili-
dad a padecer la enfermedad. Uno de estos factores es el déficit de
antitrombina (AT). La antitrombina (AT) es un inhibidor de serín
proteasas que inactiva, entre otros, al Factor IIa y Xa. El objetivo
de este estudio fue caracterizar a una familia con varios miembros
con trombosis venosa y déficit de antitrombina Cambridge tipo II.
Se realizó un estudio biológico de trombosis en la propósitus
ampliándose a sus familiares. Se incluyeron en el estudio las muta-
ciones del factor V Leiden, del gen de la protrombina F2G20210A,
del factor XII F12C46T, mutación AT Cambridge tipo II (
SER-
PINC1 G13268T
; p.Ala384Ser) y genotipo de grupo ABO.
Caso clínico:
El propósitus es un paciente mujer que a la edad
de 79 años presentó TVP poplítea idiopática. El estudio biológico
resultó portadora heterocigota G/T para la mutaciónAT Cambridge
tipo II y BO2 del grupo ABO. En su historia familiar, respecto a la
trombosis, consta una hija con TVP poplítea a los 30 años secun-
daria a un politraumatismo, en esos momentos en tratamiento con
anticonceptivos orales y fumadora. Se realizó estudio genético
donde resultó ser heterocigota la mutación F2G20210A yA1B del
ABO. Padre fallecido y con antecedente de TVP paraneoplásica.
No otros antecedentes de trombosis conocidos en la familia. Se
amplió estudio genético al resto de la familia con los siguientes
resultados relevantes: hija segunda de la propósitus (actualmen-
te 49 años): doble heterocigota para la mutación F2G20210A
y AT Cambridge tipo II y A1O2 del ABO. Nieto de la primera
hija (actualmente 30 años): homocigosis para la F2G20210A y